北京博富瑞基因診斷技術有限公司研發中心設立在廣州,目前致力于器官移植及造血干細胞移植領域相關的科學研究及臨床檢驗項目體系的優化建立,現已與數家醫院的移植科進行深入的科研合作。
研發中心現有100多平米的科研實驗區,包含獨立的細胞培養室、流式細胞室、PCR擴增室、二代測序室、免疫實驗室、科研實驗前區、科研實驗后區等。擁有流式細胞儀、Bio-Rad ChemiDoc XRS化學發光熒光成像系統、Nanodrop ONE紫外分光光度計、Bio-Rad熒光定量PCR檢測儀、ABI 3730XL一代測序儀、Illumina二代測序儀等國內外先進設備。
博富瑞科研團隊已建立RNA提取—反轉錄cDNA—qPCR檢測平臺、流式細胞儀檢測平臺、Western blot檢測平臺、載體構建基因克隆平臺、ELISPOT檢測平臺、抗原特異記憶性B細胞檢測平臺等技術平臺,同時開展多項課題,包括:(1)利用Epitope原理對器官移植患者術后的DSA進行監測研究;(2)腎移植急性排斥反應尿液中早期診斷標志物在臨床運用中研究;(3)HLA抗原特異性記憶B細胞預測器官移植術后急性排斥風險的研究;(4)HLA-DQ表達量與器官移植術后新生供體特異性HLA抗體含量關系的臨床研究。(5)利用BCR免疫組庫測序研究器官移植術后免疫系統多樣性與急性排斥的關系;(6)供體TLR、補體、凋亡相關基因表達量與腎移植病人術后存活時間的臨床研究;(7)利用TCR免疫組庫測序通過造血干細胞移植后患者免疫系統多樣性預測免疫系統重建的程度。
博富瑞研發中心,現已成為科研氛圍濃厚、科研條件良好、設備設施齊備的科研平臺。隨著新鮮力量的不斷加入,該團隊創新和科研的能力不斷加強,現已有部分項目正在準備申請專利過程中。博富瑞科研團隊歡迎各移植醫院與我們共同開展器官移植和造血干細胞移植相關的科研工作。
一、高新技術平臺
Luminex 平臺
Luminex 200液相懸浮芯片系統是基于Luminex xMAP技術的檢測儀。該技術的核心是把直徑為5.6um的聚苯乙烯小球用熒光染色的方法進行編碼,通過調節兩種熒光染料的不同配比獲得最多可達100種具有不同特征熒光譜的微球,然后將每種編碼微球共價交聯上針對特定檢測物的抗原、抗體或核酸探針等捕獲分子。應用時,先把針對不同檢測物的編碼微球混合,再加入微量待檢樣本,在懸液中靶分子與微球表面交聯的捕獲分子發生特異性結合,在一個反應孔內可以同時完成多達100種不同的檢測反應。最后用Luminex™ 200檢測分析,儀器通過兩束激光分別識別微球的編碼和檢測微球上報告分子的熒光強度。
DNA測序平臺
公司擁有3臺ABI 3730XL和2臺illumina Miseq二代測序平臺。目前經典的測序方法為sanger測序,它被公認為基因突變檢測的金標準。 隨著基因組測序的迅速發展和新一代測序技術的革命性突破,使基因測序用于臨床個體化分子診斷和治療成為可能。新一代測序反應迅速、通量大,大大降低了測序成本。我公司在illumina二代測序平臺上將新一代的測序技術應用于臨床實踐中,促進醫學與科研的迅速發展。
實時熒光PCR分析平臺
PCR熒光檢測是借助于對PCR 擴增過程中熒光信號的監控,建立實時擴增曲線,通過與標準曲線的分析,計算出DNA拷貝數。實時定量PCR技術與其它分子生物學技術相結合使定量極微量的基因表達或DNA拷貝數成為可能,將有助于臨床醫生對血液腫瘤疾病的診斷和治療。
軟件開發平臺
軟件開發平臺根據生物信息分析開發出移植排異風險系統,該系統主要服務對象為醫院,為醫院醫務人員更加迅速方便的提供針對移植患者和供者的術前 eplets 的計算和DSA 評估以及術后供患者 DSA 分析和跟蹤提供極大的幫助。
流式細胞平臺
流式細胞術(flow cytometry FCM)是當代先進的細胞分析技術之一。已普遍應用于免疫學、血液學、腫瘤學、細胞生物學、細胞遺傳學、生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域。可用于白血病/淋巴瘤的分型、白血病微小殘留(MRD)監測、腫瘤細胞異倍體分析及免疫學研究等。
血小板基因分型平臺
分子免疫血液學(MIH) 是一個在輸血醫學領域迅速興起的新技術。DNA序列的變化可以改變血小板抗原表達新分子,新的分子技術已經可以通過單核苷酸多態性(SNPs)檢測識別這些變異。 BioArray BeadChip 是一種高通量分子檢測方法,可廣泛應用于影響抗原表達的SNP檢測中。BioArray eMAP(Elongation mediated Multiplexed Analysis of Polymorphisms)技術可通過多重PCR反應結果判斷是否存在多態性。
BioArray BeadChip 檢測流程如下:首先從全血中提取目的DNA,然后進行擴增反應,接著PCR產物與連接特異性等位基因探針的微珠反應,微珠捕獲特異性等位基因后會發出熒光,最后每個珠子的熒光值在陣列成像系統(AIS)上分析后,通過結果的陰性和陽性判斷等位基因型別。BioArray 解決方案信息系統(BASIS)軟件可計算出每一個特異性基因反應的調整后的強度,同時可判斷多態性和表型。
二、合作共享